血液涂片是血细胞检查中一种非常重要的方法，在临床上有着广泛的应用。想要全面分析了解血细胞的情况，需要血涂片的制作。对于普通人来说，了解方面没什么用，但是在医学上很重要，属于专业的东西。那么，什么是血涂片的制作方法呢？让我们仔细看看。
1 玻片的清洗
将载玻片在肥皂或洗衣粉中煮沸20分钟；用热水冲洗肥皂和血膜，用自来水反复冲洗，再用蒸馏水冲洗3 ~ 5次。必要时用95%酒精浸泡1 h，然后晾干或晒干备用。将新玻璃浸泡在95%酒精或10%盐酸中24小时，然后用水彻底清洗。
2标本的收集
首先用75%的酒精给无名指消毒。酒精干了，刺破皮肤让血液自然流动。不要用力挤压。取一张干净的载玻片，让血滴在距离载玻片4 mm ~ 5 mm处。
注意用手指捏住载玻片的边缘，不要碰到它的表面。不要让载玻片与采血部位的皮肤接触。采血后迅速推玻片，防止血液凝固。如果从抗凝管中抽取血液，血液必须是新鲜的，否则会造成血细胞的破坏。
血液涂片的制备
滑道要求:1.0mm×26mm×(76±0.5)mm；推片要求:推片边缘整齐、光滑；血涂片的质量直接关系到血滴的大小、角度和推片的速度。推膜时，血滴越大，角度越大，血膜就会越厚。反之，血膜越薄，血膜分布不均匀主要是推的不均匀和载玻片不干净造成的。要做均匀的血涂片，用力一定要均匀，角度一定要始终一致。力度太轻，涂片太厚无法观察，不能推第二次。用力过猛会损伤血细胞。制成后，可以在空气中挥动，使其快速干燥，以防止血细胞收缩。同时，血膜干燥后，最好立即固定染料，避免细胞被污染溶解，长期释放效果不好；对血膜的要求:血膜均匀，薄如蝉翼，尾端呈弧形。血膜在头部、体部和尾部具有不同厚度的区域。注意患者的血液状态，如贫血程度、血液粘稠度、白细胞或有核细胞数量等因素，调整推送技巧。
4血液涂片染色
目前市场上的瑞氏快速染色液用于观察细胞形态快速清晰，但染色液往往会破坏红细胞，所以需要先用传统的瑞氏染色液覆盖血膜，再加入瑞氏快速染色液，最后加入缓冲液，缓冲液的量要充足，充分混合。染色时间:夏季缓冲液和染料较多，时间相对较短，否则染料挥发快，染料沉积在细胞上，难以识别，影响读数效果。如果染色太浅，可以按照原来的步骤重新染色。用自来水冲洗时，应缓慢冲洗，使染液的沉淀物和染色粒被除去，使其充分发挥分色作用，去除细胞染色中的浮色，显示细胞核结构和清晰的细胞形态，待干燥后用显微镜检查。涂片，如有色残留物，可通过三种方式去除:一是向涂片中加入曙红-甲基蓝染料溶液，轻轻摇动使有色残留物溶解在甲醇中，待甲醇挥发后加入蒸馏水或缓冲液。二是将血片放入水槽中，保持水平，使色渣从载玻片边缘溢出。第三种是将血切片倾斜45度，吸95%酒精慢慢滴在一边，直到酒精变成蓝色，然后用水冲洗干净，晾干。如果涂片有芳香焦油，用镜纸擦掉仍可酒精处理。判断染液是否起到了染色的作用，可以在洗涤前观察染液是否有黄色的金属光泽，如果没有，说明染色已经失败。
5 检验人员的素质
在制作高质量血片的同时，检验人员需要有扎实的基本功和丰富的工作经验。他们应精通各种细胞的正常形态和细胞形态的具体变化，同时对不同细胞在血膜中的大致分布有清楚的了解。不满意的血片要进行分析判断，找出失败的原因。外周血涂片检查通常包括以下项目。
红细胞形态:红细胞大小和血红蛋白含量的变化:小红细胞、大红细胞、巨红细胞、红细胞大小不均、低色素、阳性色素、多色。红细胞形态变化:靶红细胞、球形红细胞、椭圆形红细胞、口红细胞、镰刀形红细胞、异常红细胞。红细胞中的异常结构:包括碱性彩红细胞、霍氏小体、卡伯特环、帕彭海默小体等。
粒细胞形态: 粒细胞有无中毒性变化, 如中毒颗粒、空泡变性、核凝集、核溶解、Po hhe 小体。中性粒细胞有无核左移、核右移甚至分叶过多现象。涂片中有无异常细胞和幼稚细胞, 如白血病细胞及其形态变化( 如 Auer 小体) 、异常淋巴细胞、胞体巨大分叶过多的中性粒细胞, 有无 Pelg er- Huet 核异常, 浆内含 Alder- Reilly 体或 Chediak- Hig ashi 颗粒等。
血小板形态:观察其大小、颗粒分布，是否成簇、成堆分布，寻找巨血小板和小巨核细胞。因此，一份好的血涂片，从清洗到制作、染色，每一步都要认真、耐心地完成，才能更好地观察细胞形态，为临床医生提供可靠、真实的检验报告，更好地服务于临床。
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