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原代细胞是指从体内取出后立即培养的细胞。 一般来说，第一代培养细胞和10代以内的细胞通常称为原代细胞培养。 原代细胞培养需要经历几个阶段:准备、处理、剪切、消化分离、计数和培养。 具体说明如下:1。准备工作:将各种灭菌的培养物放在净化台上，操作前洗手消毒。 2.处理方法:点亮酒精灯，将组织块放入烧杯中，用汉克斯溶液冲洗2-3次以去除血渍。 3.剪切:用手术刀将组织切成若干小块，加入比组织块总量多30-50倍的胰蛋白酶溶液，然后倒入三角瓶中，扎好瓶口或用橡皮塞塞住。 4.消化分离:将三角烧瓶置于恒温水浴中，每隔20分钟摇晃一次。消化过程中消化液浑浊时，可以在显微镜下观察。如果组织已经分散成细胞团或单细胞，立即停止消化，低速分离后加入适量含血清的培养液。 5.计数:用计数盘计数。对于大多数细胞来说，pH值需要控制在7.2-7.4的范围内。 6.培养:在37℃的CO2培养箱中培养。瓶口需要用纱布棉塞或螺旋盖堵住。纱布棉塞容易发霉，每次更换液体时都需要更换新的棉塞。 请注意，原代细胞的培养必须确保无菌环境和细胞生长所需的足够营养。

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